被动型海曼肾炎(PHN)
动物(wù)选用(yòng)
SD大鼠:6-8周龄,雄性新(xīn)西兰大白兔
模型构建
1.近曲肾小(xiǎo)管刷状绒毛(BBM)的提取
①SD大鼠,體(tǐ)重300-350g,麻醉后无菌生理(lǐ)盐水灌注至肾脏无血;
②取肾脏,剥取肾皮质;
③肾皮质加入4°C预冷生理(lǐ)盐水匀浆,制备10%的匀浆液(10g/100mL);
④匀浆液与弗氏完全佐剂等量充分(fēn)混匀后制成油包水乳剂。
2.兔抗大鼠BBM血清的制备步骤1中制备的乳剂通过足蹠-腘窝淋巴结-耳缘静脉混合免疫法免疫兔(體(tǐ)重约3kg),待效价达1:32以上后,颈动脉插管放血,提取抗近曲肾小(xiǎo)管刷状缘微绒毛(BBM)抗血清,分(fēn)装后低温冻存备用(yòng)。
3.被动型海曼肾炎大鼠的建立
①雄性SD大鼠尾静脉注射兔抗BBM抗血清(6mL/kg);
②第一次免疫后的第4、5、6、7周分(fēn)别腹腔注射兔抗BBM抗血清(0.5mL)