非组胺诱导瘙痒模型 |
动物(wù)选用(yòng)
C57BL/6小(xiǎo)鼠(6周龄,雄性)
模型构建
小(xiǎo)鼠适应性饲养1周后,实验前小(xiǎo)鼠放入透明树脂盒内每日适应1h,3d后小(xiǎo)鼠颈背部(肩胛连線(xiàn)中点上方约5mm处)皮肤刮毛,适应1h后于模型组小(xiǎo)鼠颈背部刮毛區(qū)皮内注射氯喹50μg/50μL,生理(lǐ)盐水组小(xiǎo)鼠颈背部刮毛區(qū)注射生理(lǐ)盐水,各组注射后立即放入透明脂盒内,观察小(xiǎo)鼠行為(wèi)學(xué)变化。
瘙痒行為(wèi)學(xué)观察
小(xiǎo)鼠颈背部中央剃毛區(qū)皮下注射氯喹/生理(lǐ)盐水后,立即将小(xiǎo)鼠放回透明树脂盒内,保持室内安静,和空白对照组小(xiǎo)鼠同时由摄像机录像30min。治疗后再行观察30min,实验结束后回放录像观察小(xiǎo)鼠活动情况。行為(wèi)學(xué)观察以搔抓次数作為(wèi)评判方法:以小(xiǎo)鼠后爪离开盒子底面并搔抓皮肤,到其后爪落地或舔舐其后爪為(wèi)一次完整的搔抓动作,在此期间不管搔抓多(duō)少次均记為(wèi)1次,由2名不参加实验的工作人员记录小(xiǎo)鼠搔抓次数。
DNFB诱发的ACD慢性瘙痒模型
动物(wù)选用(yòng)
8周龄,雄性,C57BL/6小(xiǎo)鼠
模型构建
小(xiǎo)鼠饲养1周后,随机分(fēn)成模型组和对照组。在实验给药前1d用(yòng)剃毛器剔除小(xiǎo)鼠腹部和颈背部皮肤。在实验流程的第1天致敏小(xiǎo)鼠,在每只小(xiǎo)鼠的腹部皮肤处用(yòng)棉棒均匀涂抹100μL丙酮配置的0.15%DNFB溶液,此為(wèi)致敏阶段。实验的第8天开始在小(xiǎo)鼠的颈背部皮肤处涂抹同样比例丙酮配置的DNFB溶液50μL。每3d涂1次,连续2周给药,此為(wèi)激发阶段。对照组小(xiǎo)鼠用(yòng)丙酮涂抹皮肤,剂量和频率与实验组一致。在第21天处死小(xiǎo)鼠,进行皮肤和DRG的新(xīn)鲜取材
组胺诱导小(xiǎo)鼠瘙痒模型
动物(wù)选用(yòng)
6周龄,雄性,C57BL/6小(xiǎo)鼠
模型构建
实验前2d剃光小(xiǎo)鼠颈背部毛发,面积约為(wèi)2cm×3cm。实验第1天开始,给药组小(xiǎo)鼠颈部涂抹各药物(wù),涂抹7d。第4天涂完相应剂量药物(wù)后1h,除空白对照组外,每组小(xiǎo)鼠皮内注射组胺500μg(50μL)。给组胺后,录像30min,记录小(xiǎo)鼠行為(wèi)學(xué)挠痒情况。
瘙痒行為(wèi)學(xué)观察
通过小(xiǎo)鼠行為(wèi)學(xué)挠痒数观察各组之间的瘙痒严重程度。小(xiǎo)鼠肩部皮内注射组胺后,立刻将小(xiǎo)鼠放入透明观察笼,在无人安静的环境中拍摄30min,回放录像记录小(xiǎo)鼠行為(wèi)學(xué)挠痒数。1次挠痒為(wèi)小(xiǎo)鼠后爪抬起抓挠剃毛部位1次或连续多(duō)次抓挠,小(xiǎo)鼠后爪落地或缩爪停顿為(wèi)本次挠痒结束造模成功后每天观察并记录给药和激发后30min内小(xiǎo)鼠鼻涕量、喷嚏及挠鼻的次数。